|
|
|
*
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
E-Mail:
info@chemilum.ru
|
Телефон:
+7 (495) 961-47-30
|
|
Метод клеточной хемилюминесценции
|
Термином клеточная хемилюминесценция обозначается хемилюминесцентное свечение, связанное с образованием свободных радикалов отдельными типами клеток
и обусловленное специфическим ответом этих клеток на определенный раздражитель или стимул.
Метод клеточной хемилюминесценции применяется в основном для оценки функционального состояния фагоцитирующих клеток крови (нейтрофилов, моноцитов и др.)
и заключаются в том, что специфическим ответом этих клеток на стимул или раздражитель является увеличение продукции свободных радикалов и активных форм кислорода (АФК) – кислородный взрыв.
В качестве клеточных стимулов и раздражителей в различных методиках клеточной хемилюминесценции используется широкий круг веществ и физических факторов:
- опсонизированный зимозан;
- форболовый эфир миристиновой и уксусной кислот (ФМА);
- формил-метионил-лейцил-фенилаланин (фМЛФ);
- диацилглицерол (ДАГ);
- агрегированные иммуноглобулины;
- ненасыщенные жирные кислоты и лизофосфолипиды;
- ионофоры кальция;
- кристаллы сульфата бария, гидрооксиапатиты, ураты;
- частицы полистиролового латекса;
- электрический пробой мембран фагоцитов;
- и др.
Выраженность хемилюминесцентного ответа на клеточный стимул или раздражитель зависит как от состояния самих фагоцитирующих клеток, так и от специфичности используемого стимула или раздражителя.
Метод клеточной хемилюминесценции может быть использован для решения следующих научных и прикладных задач:
- Определение текущего состояния клеток – находятся ли клетки (например, фагоцитирующие клетки крови) в "спокойном" или активированном состоянии.
- Динамическое наблюдение за состоянием организма – мониторинг степени активации клеток в ходе лечения или обострения заболеваний.
- Определение способности клеток к специфической активации – обнаружение ответных клеточных реакций на различные токсины, аллергены, промышленные пыли и др.
Рекомендуемое оборудование
Для реализации метода клеточной хемилюминесценции рекомендуется использовать следующее оборудование:
|
Публикации
|
СВОБОДНЫЕ РАДИКАЛЫ И КЛЕТОЧНАЯ ХЕМИЛЮМИНЕCЦЕНЦИЯ
Владимиров Ю.А., Проскурнина Е.В.
УСПЕХИ БИОЛОГИЧЕСКОЙ ХИМИИ, 2009, Том 49, С. 341-388
Свободные радикалы – важные участники регуляторных процессов в живых клетках,
но одновременно – причина повреждения клеточных структур и триггер, запускающий каскад реакций самоуничтожения клеток - апоптоза.
|
|
ХЕМИЛЮМИНЕСЦЕНТНЫЙ АНАЛИЗ КЛЕТОК КРОВИ В МЕДИЦИНЕ: ИСТОРИЯ, ТЕОРИЯ, ПРАКТИКА
И.В. Образцов, М.А. Годков
МОЛЕКУЛЯРНАЯ МЕДИЦИНА, 2013, № 4, C. 3-9
Хемилюминесцентный анализ используется для оценки окислительного метаболизма клеток крови уже в течение полувека.
Разработаны многочисленные методики для исследования функциональной активности моноцитов и нейтрофилов.
В последние десятилетия применение хемилюминесцентного анализа в клинических и экспериментальных исследованиях позволило
расширить возможности лабораторной диагностики различных патологических процессов.
В настоящем обзоре систематизированы описанные в литературе подходы к хемилюминесцентному анализу клеток крови, перспективные для использования в клинической практике.
|
|
ОЦЕНКА ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ НЕЙТРОФИЛОВ ЦЕЛЬНОЙ КРОВИ МЕТОДОМ ДВУХСТАДИЙНОЙ СТИМУЛЯЦИИ: НОВЫЙ ПОДХОД К ХЕМИЛЮМИНЕСЦЕНТНОМУ АНАЛИЗУ
И.В. Образцов, М.А. Годков, А.М. Полимова, Е.М. Дёмин, Е.В. Проскурнина, Ю.А. Владимиров
РОССИЙСКИЙ ИММУНОЛОГИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ, 2015, Т. 9(18), № 4, C.418-425
В работе предложен новый способ анализа функциональной активности нейтрофилов,
основанный на последовательной стимуляции двумя стимулами с использованием метода активированной хемилюминесценции.
Методика, основанная на двухстадийной стимуляции клеток ФМА и фМЛФ, применена для исследования крови здоровых доноров.
В результате предложен новый способ оценки функциональной активности нейтрофилов,
адаптированный для применения в клинической практике.
|
|
ФУНКЦИОНАЛЬНАЯ АКТИВНОСТЬ НЕЙТРОФИЛОВ ПРИ ОЖОГОВОМ СЕПСИСЕ
И. В. Образцов, М. А. Годков, В. В. Кулабухов, Г. А. Владимирова, Д. Ю. Измайлов, Е. В. Проскурнина
ОБЩАЯ РЕАНИМАТОЛОГИЯ, 2017, Том 13, № 2, C. 40-51
Разработанная новая методика была использована для исследования цельной крови пациентов с ожоговой болезнью,
получены данные о функциональной активности нейтрофилов при разной тяжести течения болезни и в динамике.
В результате анализа хемилюминесцентных кривых развития респираторного взрыва нейтрофилов выявлены показатели,
характеризующие состояние иммунной системы, а именно: одно— или двухфазный ответ на стимул,
удельная активность нейтрофила «быстрой фазы», удельная активность нейтрофила «медленной фазы».
Результаты позволили выделить тенденции изменения функциональной активности нейтрофилов при ожоговой болезни.
Предложены диагностические и прогностические показатели функциональной активности нейтрофилов для оценки тяжести болезни и прогноза септического процесса.
|
|
РАДИКАЛ-ПРОДУЦИРУЮЩАЯ ФУНКЦИЯ НЕЙТРОФИЛОВ У ПАЦИЕНТОВ С АНЦА-АССОЦИИРОВАННЫМИ ВАСКУЛИТАМИ
А.Е. Шеримова, М.М. Созарукова, Т.Н. Краснова, Е.В. Проскурнина, П.И. Новиков, Н.А. Мухин
КЛИНИЧЕСКАЯ ФАРМАКОЛОГИЯ И ТЕРАПИЯ, 2017, Т. 26, № 5, С. 37-40
У пациентов с АНЦА-ассоциированным васкулитом выявлено увеличение внеклеточной и снижение внутриклеточной радикал-продуцирующей способности нейтрофилов.
Величина показателей свободнорадикального дисбаланса и форма кривых отличались в зависимости от тяжести и течения заболевания.
У пациентов с АНЦА-ассоциированными васкулитами наблюдаются нарушения радикал-продуцирующей функции нейтрофилов, которые могут иметь значение для прогнозирования течения заболевания.
|
|
ФУНКЦИОНАЛЬНАЯ АКТИВНОСТЬ ЛЕЙКОЦИТОВ В СЕМЕННОЙ ЖИДКОСТИ ПРИ ПАТОСПЕРМИИ
Е.В. Проскурнина, Н.А. Мельников, В.Б. Черных, С.Ю. Чистякова, Д.А.Охоботов, А.А. Камалов
УРОЛОГИЯ, 2019, № 6, С. 57-61
Исследованы образцы нативного эякулята от 95 мужчин репродуктивного возраста, обратившихся для спермиологического обследования.
Продукцию активных форм кислорода (АФК) в лейкоцитах семенной жидкости определяли по оригинальной методике,
основанной на методе кинетической хемилюминесценции, адаптированной к исследованию эякулята.
Выявлены статистически значимые (p<0,05) различия по продукции АФК лейкоцитами по амплитуде как базального,
так и стимулированного ответа между группами «нормозооспермия», «патозооспермия» и «патозооспермия+лейкоспермия».
|
|
ОБРАЗОВАНИЕ ВНЕКЛЕТОЧНЫХ ЛОВУШЕК НЕЙТРОФИЛОВ ПОД ДЕЙСТВИЕМ СТЕАРИЛАМИН-СОДЕРЖАЩИХ ЛИПОСОМ И ИХ ВЛИЯНИЕ НА КИСЛОРОДНЫЙ ВЗРЫВ
Н.Ю. Лотош, С.О. Тимохина, И.К. Малашенкова, Г.М. Сорокоумова, Р.Г. Василов, А.А. Селищева
РЕЦЕПТОРЫ И ВНУТРИКЛЕТОЧНАЯ СИГНАЛИЗАЦИЯ, 2017, С. 45-50
Целью данной работы является изучение действия СА-липосом на кислородный взрыв (КВ) нейтрофилов человека, как интактных, так и стимулированных различными активаторами
(зимозаном, форбол-12-миристат-13-ацетатом (форболовым эфиром)) методом хемилюминесценции люминола, а так же обнаружение нейтрофильных внеклеточных ловушек с помощью световой и флуоресцентной микроскопии.
|
|
ПРОДУКЦИЯ АКТИВНЫХ ФОРМ КИСЛОРОДА МОНОЦИТ–ПРОИЗВОДНЫМИ МАКРОФАГАМИ ИЗ КРОВИ ЗДОРОВЫХ ДОНОРОВ И БОЛЬНЫХ ИБС
Биленко М.В., Владимиров Ю.А., Павлова С.А., Туй Нгуен Тхи Тху, Йен Чан Тхи Хай
БИОМЕДИЦИНСКАЯ ХИМИЯ, 2008 Т. 54, Вып. 4, С. 445-453
Продукция активных форм кислорода (АФК) макрофагами, полученными из моноцитов
крови здоровых доноров (МФН) и больных ИБС (МФИБС) до, во время и после их совместной инкубации с ЛПНП,
полученными из плазмы крови здоровых доноров (ЛПНПН) и людей с гиперхолестеринемией (ЛПНПГ)
была исследована методом люминол-зависимой и стимулированной хемилюминесценции (ХЛ).
|
|
Патенты
|
СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ РЕЗЕРВА РЕАКТИВНОСТИ НЕЙТРОФИЛОВ (ОКСИДАНТНОГО ПОТЕНЦИАЛА)
Дружинина Т.А., Левашова О.А.
РОССИЙСКИЙ ПАТЕНТ № 2457488
Изобретение относится к биологии, медицине, в частности к лабораторной диагностике, иммунологии,
и описывает способ определения резерва реактивности (оксидантного потенциала) нейтрофилов,
в котором проводят измерение светосуммы спонтанной хемилюминесценции цельной разведенной крови в растворе люминола сразу
после взятия крови и через 4 часа после ее инкубации.
|
|
СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ РАЗВИТИЯ ГНОЙНЫХ ОСЛОЖНЕНИЙ ОСТРОГО ПАНКРЕАТИТА
Теплякова О.В., Винник Ю.С., Савченко А.А., Коленчукова О.А., Перьянова О.В., Осипова Н.П., Онзуль Е.В.
РОССИЙСКИЙ ПАТЕНТ № 2454671
Изобретение относится к медицине
и описывает способ прогнозирования развития гнойных осложнений острого панкреатита,
включающий лабораторное исследование крови,
где у больных оценивают параметры кинетики хемилюминесценции лейкоцитов,
активированной взвесью клинических штаммов Acinetobacter baumannii или Pseudomonas aeruginosa или
метицилленрезистентного Staphylococcus aureus - MRSA.
|
|
СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ СПОСОБНОСТИ ФАГОЦИТИРУЮЩИХ КЛЕТОК
Теплякова О.В., Винник Ю.С., Савченко А.А., Коленчукова О.А., Цедрик Н.И., Перьянова О.В., Хохлова О.Е., Юрьева М.Ю.
РОССИЙСКИЙ ПАТЕНТ № 2445626
Изобретение относится к области медицины, а именно иммунологии, хирургии, реаниматологии.
Сущность способа определения функциональной способности фагоцитирующих клеток заключается в том,
что проводят хемилюминесцентный анализ функциональной активности лейкоцитов крови.
|
|
СПОСОБ ОЦЕНКИ ЭФФЕКТИВНОСТИ ТЕРАПИИ ХРОНИЧЕСКОГО ХОЛЕЦИСТИТА
Михалик Д.С., Моисеенкова Л.С., Леонов С.Д.
РОССИЙСКИЙ ПАТЕНТ № 2438592
Изобретение относится к области медицины, в частности к гастроэнтерологии.
Для оценки эффективности терапии хронического холецистита у больных хроническим холециститом
после проведенного лечения проводят хемилюминесценцию лейкоцитов цельной крови
с определением пика максимальной интенсивности спонтанной хемилюминесценции лейкоцитов.
|
|
СПОСОБ ПРОГНОЗА ЭФФЕКТИВНОСТИ ЛЕЧЕНИЯ ОСТРОГО РИНОСИНУСИТА
Коленчукова О.А., Савченко А.А.
РОССИЙСКИЙ ПАТЕНТ № 2438134
Изобретение относится к медицине, в частности к оториноларингологии и иммунологии.
Сущность способа прогнозирования эффективности лечения острого риносинусита заключается в том,
что с помощью хемилюминесцентного анализа исследуют функциональную активность нейтрофильных гранулоцитов периферической крови пациента.
|
|
СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АНТИБАКТЕРИАЛЬНОЙ РЕЗИСТЕНТНОСТИ ОРГАНИЗМА ЧЕЛОВЕКА
Коленчукова О.А., Савченко А.А.
РОССИЙСКИЙ ПАТЕНТ № 2431837
Изобретение относится к медицине, в частности к иммунологии,
и описывает способ определения антибактериальной резистентности организма человека
при заболеваниях, вызванных стафилоккоковой инфекцией, основанный на исследовании нейтрофилов крови,
при этом функциональную активность нейтрофильных гранулоцитов периферической крови пациента исследуют с
помощью хемилюминесцентного анализа, определяют индекс бактериальной активации нейтрофилов (ИБА-индекс).
|
|
СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СТЕПЕНИ ТЯЖЕСТИ ОСТРОГО ПАНКРЕАТИТА
Дунаевская С.С., Винник Ю.С., Портнягин Е.В.
РОССИЙСКИЙ ПАТЕНТ № 2413466
Изобретение относится к медицине
и может быть использовано для определения степени тяжести острого панкреатита.
Для этого проводят хемилюминесценцию лимфоцитов больного и определяют уровень продукции активных форм кислорода.
|
|
СПОСОБ ЭКСПРЕСС-ДИАГНОСТИКИ ТЯЖЕСТИ ИШЕМИЧЕСКИХ ПОВРЕЖДЕНИЙ СЕРДЦА
У БОЛЬНОГО С ИШЕМИЧЕСКОЙ БОЛЕЗНЬЮ СЕРДЦА
И ПРЕДРАСПОЛОЖЕННОСТИ БОЛЬНОГО К ПРОГРЕССИРОВАНИЮ АТЕРОСКЛЕРОЗА
Биленко М.В., Владимиров Ю.А., Хильченко А.В., Павлова С.А.
РОССИЙСКИЙ ПАТЕНТ № 2408019
Изобретение относится к медицине, в частности к кардиологии,
и касается способа экспресс-диагностики тяжести ишемического повреждения сердца
и предрасположенности больного с ишемической болезнью сердца (ИБС) к прогрессированию атеросклероза.
Сущность способа заключается в том, что проводят оценку степени стимуляции атерогенной функции моноцит-производных
макрофагов из крови больных с ИБС.
|
|
СПОСОБ ПРОГНОЗА ВЕРОЯТНОСТИ НЕБЛАГОПРИЯТНОГО ИСХОДА ПАНКРЕОНЕКРОЗА В ПОСЛЕОПЕРАЦИОННОМ ПЕРИОДЕ
Цедрик Н.И., Теплякова О.В., Винник Ю.С., Филина Н.Г.
РОССИЙСКИЙ ПАТЕНТ № 2398520
Изобретение относится к медицине, может быть использовано в хирургии, реаниматологии.
У больных панкреонекрозом оценивают параметры перекисной резистентности эритроцитов и при регистрации спада интенсивности хемилюминесценции
эритроцитов на фоне увеличения светосуммы к третьим суткам послеоперационного периода прогнозируют неблагоприятный исход.
|
|
СПОСОБ ПРИЖИЗНЕННОЙ ДИАГНОСТИКИ ТУБЕРКУЛЕЗА
Ощепков В.Г., Дюсенова Г.М.
РОССИЙСКИЙ ПАТЕНТ № 2389020
Изобретение относится к иммунологии в медицине и ветеринарии.
Способ прижизненной диагностики туберкулеза включает выделение полиморфноядерных лейкоцитов,
сохранение их в стабилизирующем растворе и определение индуцированной люминолзависимой хемилюминесценции
с использованием в качестве индуктора «дыхательного взрыва» опсонизированного зимозана,
а в качестве дополнительного индуктора - инактивированной вакцины БЦЖ.
|
|
БИОХЕМИЛЮМИНЕСЦЕНТНЫЙ СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФАГОЦИТАРНОЙ АКТИВНОСТИ НЕЙТРОФИЛОВ
Дерябин Д.Г., Каримов И.Ф.
РОССИЙСКИЙ ПАТЕНТ № 2366953
Изобретение относится к области лабораторной диагностики
и может быть использовано для определения фагоцитарной активности нейтрофилов периферической крови человека.
Сущность способа: в качестве объектов фагоцитоза используют рекомбинантные люминесцирующие бактерии,
а именно микроорганизмы Escherichia coli с клонированными luxCDABE генами Photobacterium leiognathi,
предварительно опсонизированные в течение 10 мин нормальным иммуноглобулином человека.
|
|
|
В начало страницы
|
|